Gross and histopathological pitfalls found in the examination of 3338 cattle brains submitted to the BSE surveillance program in Brazil / Ciladas macroscópicas e histopatológicas encontradas no exame de 3338 encéfalos de bovinos submetidos ao programa de vigilância da EEB no Brasil

This study stems from the findings during the gross and histopathological exam of 3,338 cattle brains as part of the bovine spongiform encephalopathy (BSE) active surveillance program of the Brazilian Ministry of Agriculture, Livestock, and Supply from 2001 to 2005. The work was carried out in the Veterinary Pathology Laboratory of the Federal University of Santa Maria which at the time (2001-2007) was the national reference laboratory for the diagnosis of BSE and other transmissible spongiform encephalopathies. Both gross and histopathological aspects are described. Several gross aspects were annotated: anatomic normal structures not commonly recognized (non-lesions), lesions of no clinical significance, postmortem changes and artifacts; all these can amount to important pitfalls that distract the pathologist during the routine gross examination of the central nervous system (CNS). Accordingly, equivalent pitfalls were described in the histological examination. Non-lesions observed were the pineal body, embryo remnants such as the external germinal layer of the cerebellum, subependymal plates, and clusters of neuroblasts in the basal ganglia; or circumventricular structures such as area postrema, subcomisural organ, and melanosis in the leptomeninges and vessel walls. Lesions with little or no clinical importance included age-related changes as lipofuscin, hemosiderin, mineralization and hyalinization of vessel walls within the brain and meninges. Corpora amylacea and corpora arenacea were detected respectively in astrocyte processes and the pineal body. Cytoplasmic neuronal vacuolization was observed in the red nucleus and habenular nucleus. Sarcocystis sp. without a correspondent inflammatory reaction was rarely observed. Included within findings with no clinical manifestation were axonal spheroids and perivascular mononuclear cuffings. Changes in the CNS due to killing, sampling and fixation methods can obscure or distract from the more critical lesions. The ones related to the process of killing included hemorrhages caused in cattle destroyed by a captive bolt. Artifacts related to sampling and handling of CNS tissue consisted of inclusion of bone sand in the neural tissue from sawing the calvarium; dark neurons produced by excessive handling of the brain, and micro-organisms that contaminated the tissues during sampling or histological processing. Postmortem autolytic or putrefactive changes observed included vacuolar changes in the myelin sheath, clear halos surrounding neurons and oligodendrocytes, clusters of putrefaction bacilli within vessels or dispersed throughout the brain tissue associated or not to clear halos. One interesting, and somewhat frequent, postmortem autolytic change found in the bovine brain was the partial dissolution of the granule cell layer (GCL) of the cerebellum, also referred to as conglutination of the GCL or as the French denomination "état glace". Due to the shortage of comprehensive publications in the subject, this review is intended to address the main pitfalls that can be observed in the brain of cattle hoping to help other pathologists avoiding misinterpret them.(AU)

Os resultados deste estudo foram obtidos pelo exame macroscópico e histopatológico de 3.338 cérebros de bovinos examinados durante o programa de vigilância ativa da encefalopatia espongiforme bovina (BSE) do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA), de 2001 a 2005. O trabalho foi realizado no Laboratório de Patologia Veterinária (LPV) da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM) que, de 2001 a 2007, foi o laboratório nacional de referência para o diagnóstico da BSE e de outras encefalopatias espongiformes transmissíveis. Macroscopicamente, foram descritas estruturas anatômicas normais (não-lesões), mas que são, com frequência, interpretadas como lesões; lesões sem significado clínico; alterações pós-mortais e artefatos. Esses achados podem confundir e desviar a atenção do patologista durante o exame de rotina do sistema nervoso central (SNC). Da mesma forma, estruturas equivalentes foram descritas no exame histológico. As não-lesões observadas foram corpo pineal, remanescentes embrionários, como a camada germinativa externa do cerebelo, placas subependimárias e aglomerados de neuroblastos nos gânglios da base; ou estruturas circunventriculares, como área de postrema, órgão subcomissural e melanose em leptomeninges e paredes dos vasos. Lesões com pouca ou nenhuma importância relacionadas ao envelhecimento incluíram lipofuscina, hemossiderina, mineralização, hialinização das paredes dos vasos do encéfalo e das meninges. Corpora amylacea foram detectados em processos astrocíticos e corpora arenacea, no corpo pineal. Adicionalmente, foi observada vacuolização no citoplasma de neurônios do núcleo vermelho e do núcleo habenular. Sarcocystis sp. sem reação inflamatória correspondente foi raramente observado. Incluídos nos achados sem manifestação clínica estavam esferóides axonais e manguitos mononucleares perivasculares. Alterações no SNC causadas pelo método de abate, amostragem e fixação podem simular ou obscurecer lesões mais importantes. Aquelas relacionadas ao método de abate incluíram hemorragias causadas em bovinos dessensibilizados pelo dardo cativo ou por punção por faca da medula na articulação atlanto-occipital. Artefatos relacionados à amostragem e manuseio de tecido do SNC consistiram na inclusão de pó de osso no tecido neural em consequência do uso de serra para abrir a caixa craniana; neurônios escuros produzidos pelo manuseio excessivo do cérebro e micro-organismos que contaminaram os tecidos durante a amostragem ou processamento histológico. Alterações autolíticas pós-mortais ou de putrefação incluíram vacuolizações na bainha de mielina, halos claros em torno dos neurônios e oligodendrócitos, aglomerados de bacilos de putrefação dentro dos vasos ou dispersos em todo o tecido cerebral, relacionados ou não a halos claros. Uma alteração autolítica pós-mortal intrigante e relativamente frequente encontrada foi a dissolução parcial da camada de células granulares (CCG) do cerebelo, também referida como conglutinação da CCG ou "état glacé". Devido à escassez de publicações abrangentes neste assunto, esta revisão pretende abordar as principais ciladas que possam aparecer no cérebro de bovinos, na esperança de ajudar outros patologistas a evitar interpretá-las erroneamente.(AU)

Mycobacterium paratuberculosis detection in cow's milk in Argentina by immunomagnetic separation-PCR

Abstract The aim of this study was to standardize a diagnosis procedure to detect Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map) DNA in raw cow milk samples under field conditions. A procedure that combines both immunomagnetic separation and IS900 -PCR detection (IMS-IS1 PCR) was employed on milk samples from 265 lactating Holstein cows from Map infected and uninfected herds in Argentina. IMS-IS1 PCR results were analyzed and compared with those obtained from milk and fecal culture and serum ELISA. The extent of agreement between both tests was determined by the Kappa test. IMS-IS1 PCR showed a detection limit of 101 CFU of Map/mL of milk, when 50:50 mix of monoclonal and polyclonal antibodies were used to coat magnetic beads. All of the 118 samples from the Map uninfected herds were negative for the set of the tests. In Map infected herds, 80 out of 147 cows tested positive by milk IMS-IS1 PCR (55%), of which 2 (1.4%) were also positive by milk culture, 15 (10%) by fecal culture, and 20 (14%) by serum ELISA. Kappa statistics (95% CI) showed a slight agreement between the different tests (<0.20), and the proportions of agreement were ≤0.55. The IMS-IS1 PCR method detected Map in milk of the cows that were not positive in other techniques. This is the first report dealing with the application of IMS-IS1 PCR in the detection of Map in raw milk samples under field conditions in Argentina.

Infection by Neospora caninum in dairy cattle belonging to family farmers in the northern region of Brazil / Infecção por Neospora caninum em bovinos leiteiros de agricultores familiares da região norte do Brasil

Neosporosis is considered a major cause of abortion among cattle worldwide. The aim of this study was to investigate the prevalence of anti-Neospora caninum antibodies in dairy cattle and correlate them with possible risk factors on 63 small farms (family farms) in the municipality of Ji-Paraná, the main milk-producing region of the state of Rondônia, northern Brazil. For this purpose, 621 serum samples were collected from cows and were evaluated by means of the indirect fluorescence antibody test (IFAT). The overall herd prevalence of N. caninum antibodies among the farms (38/63; 60.31%) showed that N. caninum are widespread among the dairy herds in this region, despite only infecting a small proportion of animals (66/621, 10.62%). Occurrences of abortion and birth of weak calves were the only variables that showed as risk factors for the presence of N. caninum. The result from the spatial lag model strongly indicated that birth of weak calves and presence of N. caninum are occurring on farms that are located close to each other, indicating aggregation of disease occurrence.

Neosporose é considerada uma das principais causas de aborto em rebanhos bovinos em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi investigar a prevalência de anticorpos anti-Neospora caninum em bovinos de leite e correlacioná-los com possíveis fatores de risco em 63 pequenas propriedades rurais (agricultura familiar), no município de Ji-Paraná, uma das principais regiões produtoras de leite do Estado de Rondônia, norte do Brasil. Para este propósito, 621 amostras de soro foram coletadas de vacas leiteiras e avaliadas por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI). A prevalência total de propriedades com animais positivos a anticorpos anti-N. caninum (38/63; 60,31%) indica que o parasito está difundido entre os rebanhos leiteiros da região, apesar de infectar uma pequena proporção de animais (66/621; 10,62%). Ocorrência de abortos e nascimento de bezerros fracos foram as únicas variáveis consideradas como fatores de risco para a ocorrência de N. caninum. O resultado do modelo de análise espacial indica que o nascimento de bezerros fracos e a presença de N. caninum estão aparecendo em fazendas localizadas próximas umas das outras, indicando a ocorrência de agregação da doença.

Caracterización de los procesos neumónicos en becerros lecheros de la región de Tijuana Baja California, México / Characterization of sairy calf pneumonia in Tijuana, Baja California, Mexico

Este estudio se realizó con objeto de caracterizar los procesos neumónicos sufridos por becerras lecheras de Tijuana, Baja California, México, así como conocer la importancia relativa de los principales agentes bacterianos involucrados. En 12 establos, con distintos tipos de alojamientos para sus crías, se obtuvieron muestras pulmonares de un total de 100 becerras, de 15 días a 4 meses de edad, con antecedentes de haber padecido neumonía. La mayor parte de los problemas neumónicos se presentaron en granjas que alojaron a sus crías dentro de edificios, mientras que las que utilizaban casetas exteriores mostraron el menor índice de mortalidad ocasionado por neumonías. Las muestras pulmonares fueron sembradas por duplicado en agar sangre y agar chocolate, e incubadas a 37oC por 24 h en aerobiosis o microaerobiosis, respectivamente. Las bacterias aisladas fueron identificadas de acuerdo a los métodos bioquímicos rutinarios, utilizando cepas de referencia como control. Se aisló Pasteurella multocida en 34 animales, P. haemolytica en 31 casos y Haemophilus somnus en 11 ocasiones. Además se aislaron diversas bacterias consideradas como secundarias: Streptococcus spp en 12 casos y Staphylococcus spp en 7 animales. La totalidad de las cepas aisladas de P. multocida fueron clasificadas como del biotipo A, al igual que las 31 cepas de P. haemolytica. De estas últimas, 26 cepas (83.9 por ciento) se clasificaron como serotipo 1 y solamente 2 cepas se caracterizaron como serotipo 2, detectándose 3 cepas no tipificables

Niveles comparativos de Selenio en pelo de bovinos sanos a nivel del mar, con los de insuficienia cardiaca del valle de México / Selenium hair concentration of heifer from the Valley of Mexico suffering from sudden heart failure death and from healthy heifers at sea level

Se analizó el contenido de Selenio en el pelo de 31 vaquillas de la raza Holstein de Tizayuca, Hidalgo, con edad promedio de 9 meses que debido a insuficiencia cardiaca murieron inesperadamente y en 6 grupos de vacas (38) tipo carne clínicamente sanas (cruza de Cebú) de Tabasco y Veracruz.La medición del contenido de Selenio se practicó por espectrofotometría de absorción atímica y con generación de hidruros. El equipo de detección se calibró para tomar como mínima lectura 0.012 ppm. De las 31 muesras sólo el 21 por ciento tuvo valores superiores a 0.012 ppm; esto significó que en el 79 por ciento restante el contenido de Selenio era menor a 0.012 ppm. Las 7 muesras (21 por ciento) donde sí se obtuvo lectura se compararon con los 6 grupos de los estados de Tabasco y Veracruz. La concentración promedio detectable de Selenio de los animales de Tizayuca fue de 0.067 ppm, mientras que el contenido promedio de Selenio de los 6 grupos fue de 0.124, 0.064, 0.108, 0.113, 0.147 y 0.066 ppm respectivamente para ada uno. Los resultados de los animales de tizayuca, así como los de los 6 grupos, difieren de manera significativa con los resultados obenidos por otros autores (0.250 ppm).Se concluye que el pelo de los animales muestreados de Tizayuca presentó deficiencia en el contenido de Selenio; este hallazgo se relaciona altamente con la insuficiencia cardiaca. Los animales de Tabasco y Veracruz también sufren de deficiencia de Selenio pero no sufren de insuficiencia cardiaca, posiblemente por su habitat a nivel del mar.